本作に登場する主要キャラクターたちは、キャスト陣の魂が乗り移ったかのような強烈な個性を放っています。
アシタカ役：松田洋治
『風の谷のナウシカ』でペジテの市長の息子・アスベルを演じた松田洋治さんは、宮崎監督からの絶対的な信頼を得てアシタカ役に抜擢されました。感情を過剰に誇張せず、まっすぐで凛とした声の響きは、呪いを受けながらも「曇りなき眼（まなこ）で見定める」アシタカの高潔な精神性を完璧に体現しています。
モロの君役：美輪明宏
三百歳になる巨大な山犬の神・モロの君を演じたのは美輪明宏さんです。「黙れ小僧！」という叱責の響きに見られる圧倒的な神の威厳と、愛娘であるサンを慈しむ母性の両立は、美輪さんにしか成し得ない至芸でした。美輪さんの神がかった演技に宮崎監督もスタジオで感嘆し、後の『ハウルの動く城』での荒地の魔女役への起用へと繋がっていきます。
エボシ御前役：田中裕子
タタラ場を率いる冷徹かつ慈悲深い指導者・エボシ御前を演じたのは、世界的名女優の田中裕子さんです。神々を撃ち殺す現実主義者でありながら、売られた女性たちや病者を人間として遇する複雑な人間味を、艶やかさと芯の強さを兼ね備えた低音ヴォイスで見事に表現しました。
ジコ坊役：小林薫
謎の組織「師匠連」の命を受けてシシ神の首を狙う僧侶・ジコ坊には、実力派俳優の小林薫さんが起用されました。飄々とした振る舞いの奥に怜悧な現実主義を隠し持つジコ坊の人間臭さは、小林薫さんの巧みな台詞回しによって唯一無二の味わいを獲得しています。
