乙女湖へのアクセスは、中央自動車道「勝沼IC」から国道140号を経由し、山梨県道219号(クリスタルライン)を北上するルートが一般的です。勝沼ICからの所要時間は車で約50分ほど。道中はブドウ畑が広がる甲府盆地の景色から次第に深い渓谷美へと変化し、走りごたえのあるワインディングロードが続きます。
ドライバーが絶対に把握しておくべき注意点が冬期の長期通行止めです。豪雪と路面凍結のため、乙女湖へと続く県道219号や林道エリアは、例年12月上旬から翌年4月下旬まで冬期閉鎖されます。秋の終わり頃には早くも積雪やブラックアイスバーンが発生するため、11月以降に訪れる場合はスタッドレスタイヤの装着や最新の道路交通情報の確認が欠かせません。